طريقة جديدة واعدة لفتح الجينوم البشري أمام مطوري الأدوية لكنهم سيحتاجون إلى وضع القواعد أولاً.

تعرف الباحثون على تسلسل الجينات للجنس البشري. حيث تقوم الخلايا بالحفاظ على نسبة البروتينات الصحيحة في الكائن الحي. إن المتحكم الرئيسي في إدارة هذا التوازن هو بروتين صغير يعرف باسم يبوكيوتين. لا تقاس قدرة مُحلل البروتين بمدى ارتباطه بالبروتين، إنما بالسرعة التي يمكن أن يجمع بها الجزيء ثنائي الوظيفة. على الرغم من أن آلية يبوكيوتين_بروتاسيوم البشري تحتوي على أكثر من 600 من روابط E3، إلا أن العلماء توصلوا حتى الآن إلى روابط تحتوي على عدد قليل منها فقط.

بقلم ليزا م. جارفيس.

– حصل الباحثون أخيرًا على لمحة عن الأبعاد الحقيقية للبروتينات لدينا عندما تم فك تسلسل الجينوم البشري لأول مرة – عشرات الآلاف من البروتينات المسؤولة عن المرض والصحة. منذ ذلك الحين، اكتشف العلماء مستنقع مُسببات الأمراض منتجين قائمة طويلة من البروتينات التي يرغبون في التحكم بها.

– ولكن حتى بعدما أضاف الباحثون للقائمة فهم لا يزالون يبحثون عن الأدوية بشكل جنوني؛ لذا فإن الوصول إليها صعب المنال. يمكن للأدوية التقليدية ذات الجزيئات الصغيرة والأجسام المضادة الوصول إلى حوالي 20 ٪ فقط من البروتينات التي نُصنعها.

لذلك ينتبه الجميع عندما تأتي التكنولوجيا الجديدة الواعدة للاستفادة مما يقرب من 80 ٪ من جيناتنا الأخرى. لقد جمعت مليارات الدولارات مناهج مثل إخماد عمل البروتين بواسطة الحمض الأميني الريبوزي وتحرير الجينات -على مر السنين- لتمويل إمكاناتها لإيقاف نشاط البروتينات التي لم يكن من الممكن الوصول إليها سابقًا.

ولكن مثل هذه الطرائق الجديدة قد تأتي مع آلام متزايدة أو مشاكل في وصول الدواء للهدف وفاعليته وأسئلة عن ما إذا كان آمنًا – تجعل المنحنى من الفكرة إلى العلاج المسوق طويلًا بشكل مبالغ فيه. ماذا لو كان بإمكانك بدلاً من ذلك إعادة تخيل أولد هورسوورك – عقار الجزيئات الصغيرة – إلى نوع جديد من الأدوية؟

يهدف الباحثون المطورون لمُحللات البروتينات المستهدفة إلى القيام بذلك، حيث تمنع الجزيئات الصغيرة التقليدية نشاط البروتين. وعلى العكس، فإن هذه الجزيئات الصغيرة ثنائية الوظائف تقضي على البروتين تمامًا عن طريق توجيهه إلى البروتيزومات ضاغطة الخلايا الغير مرغوب بها.

تعمل خلايانا دائمًا في الحفاظ على المستويات الصحيحة من البروتينات حيث تُصنع وتتخلص من عشرات الآلاف منها في أي وقت. المتحكم الرئيسي في إدارة هذا التوازن هو بروتين صغير يعرف باسم يبوكيوتين، فعندما يقترب من البروتينات المُنهكة يوجهها إلى البروتوسوم للتخلص منها.

يريد الباحثون الذين يطورون متحلل البروتين اقتحام آلية عمل بروتين يبوكيوتين لتغيير مصير البروتينات المسببة للأمراض. يقومون بتصميم جزيئات صغيرة ذات نهايتين نشيطتين لإتمام ذلك: واحدة ترتبط بالبروتين المَعني والأخرى ترتبط ببروتين يُسمى أنزيم الإي3 يبوكيوتين الرابط، هذه الجزيئات ثنائية الوظائف تفرض مصافحة للتخلص منهما، مستنفدة بسرعة مستويات البروتين غير المرغوب فيها، ثم تبدأ في تكرار العملية مرة أخرى.

فضول الفرص التجارية

على الرغم من أن شركات رأس المال الاستثماري وشركات الأدوية الكبرى بدأت تنتبه لانحلال البروتين المستهدف، فإن المفهوم ليس بجديد. في الواقع، قدمت شركة للتكنولوجيا الحيوية تسمى بروتيونكس براءة اختراع في أواخر التسعينات تحدد كيف يمكن لجزيء ثنائي الوظيفة أن يخطف نظام يبوكيوتين الخلوي. يقول أحد مؤلفي براءة الاختراع، جون كينتين، إنه لم يستطع أبدًا إثارة رؤسائه حول هذا المفهوم وترك الشركة في نهاية المطاف.

في ذلك الوقت، بدأ علماء أكاديميون من بينهم عالم الأحياء الكيميائي بجامعة ييل كريج كروز وعالم الأحياء الخلوي بمعهد كاليفورنيا للتكنولوجيا ريمون ديشايس، بنشر جزيئات تشبه عمل البيبتيد والتي يمكنها على الأقل وبشكل مقبول تحفيز انحلال البروتين. لكن المركبات لم يكن لديها الخصائص اللازمة لتكون أدوية وتجاهلت الصناعة إلى حد كبير هذا البحث.

يقول آندي فيليبس الرئيس والمدير العلمي لشركة جديدة أخرىc4 Therapeutic إن تدهور البروتين يتطلب قفزة ثقة في الصناعة, ويقول: “بعد 120 عامًا من المعرفة التي تم حلها جيدًا حول التثبيط، من الصعب إعادة التفكير في كيفية ظهور عقاقير الجزيئات الصغيرة وعملها.”

في عام 2008، جمع معمل Crews فريقًا من الكيميائيين والفيزيائيين الحيويين لتجاوز مركبات الببتيد المبكرة. هدفهم: أول دواء محفز للجزيئات الصغيرة، وهي طريقة أطلق عليها اسم “بروتاك” للكيميرا التي تستهدف انحلال البروتين.

بحلول نهاية العام، توصلوا إلى جزيء صغير قام بتجنيد أنزيم يبوكيوتين إي3 الرابط باستخدام  رابط يعرف باسم نوتلين، لكن نشاطه كان ضعيفًا جدًا لتحويله إلى عقار. على مدى السنوات القليلة المقبلة، تجاوز الباحثون المشكلة، حيث أطلقوا مئات الجزيئات وحلوا العديد من هياكل البروتين الكريستالية. كما نشر معمل Crews وتلك التي يديرها باحثون مثل يوتشي هاشيموتو بجامعة طوكيو عن الجزيئات ثنائية الوظيفة، بدأ آخرون في ملاحظة ذلك. يقول الطاقم إنه مقتنع أنه لولا تلك السنوات من العمل، لكانت البروتاكات قد ماتت بهدوء شديد كفضول بيولوجي كيميائي لطيف.

كان أحد التحديات الرئيسية لفريق Crews هو العثور على مكان ربط أنزيم إي3 الرابط، وهو نصف الجزيء متعدد الوظائف الذي يتسبب في إضافة علامة التخلص من يبوكيوتين ، تكمن المشكلة في أن استخدام أنزيم يبوكيوتين إي3 الرابط غالبًا ما يعني تعطيل مركب متعدد البروتين- وهو عمل صعب تاريخيًا.

أمضى عالم الأحياء الكيميائية أليسيو سيولي في عام 2009 بضعة أشهر كزميل ما بعد الدكتوراه في مختبر Crews للعمل على حل المشكلة. استمر التعاون عندما بدأ سيولي مجموعته في جامعة دندي. في أوائل عام 2012، أظهروا لأول مرة رابط لبروتين  von Hippel-Lindau المميز، ومنحوا المجال أول جزيء صغير VHL للعمل معه.

كانت خطوة حاسمة إلى الأمام في هذا المجال. أنشأت شركة جلاكسوسميثكلين لاحقًا مجموعتها المُحللة للبروتينات وأقامت شراكة مع جامعة Yaleلتزويد مختبر Crews بخبرة مُحنكة في الكيمياء الطبية الصناعية.

بالنسبة للعديد من الكيميائيين الطبيين، كانت هذه الهياكل غريبة حقًا.

—إيان تشرشر، نائب رئيس اكتشاف الأدوية، BenevolentAI

ثم في عام 2015، أثارت مجموعتان من الاكتشافات الهيجان الحالي لانحلال البروتين. نشر برادنر، في الوقت الذي كان يقود مجموعة بيولوجيا كيميائية في معهد دانا فاربر للسرطان، أداة إحلال جزيئات صغيرة تتميز بمكون جديد لربط الليجاز E3: مجموعة ثاليدومايد ترتبط بالcereblon، وهو يبوكيوتين الرابط(Science 2015 ، DOI: 10.1126 / العلوم. aab1433). في نفس الوقت تقريبًا، نشر فريق Crews أداة تحلل الجزيئات الصغيرة الخاصة بها (ACS Chem. Biol. 2015 ، DOI: 10.1021 / acschembio.5b00442).

بدأ المستثمرون يتجهون لهذا المجال، حيث يقول نيلو ماينولفي، مؤسس ورئيس قسم التكنولوجيا في Kymera Therapeutics ، وهي – شركة تصب اهتمامها على انحلال البروتين، بدأت شركة Atlas Venture ،وهي شركة لرأس المال الاستثماري، في بناءها في أواخر عام  2015، :”هذا المزيج من المجال الذي ينضج مع فرصة استكشاف المنطقة المجهولة من 85 ٪ المتبقية من البروتين البشري مع هذه التكنولوجيا كان من المستحيل حقًا نقله”.

قامت Crews بتأسيس Arvinas قبل عامين لتسويق منتجات بروتاك. في عام 2016، شكل برادنر وباحثون أكاديميون آخرون C4، وتلقوا 73 مليون دولار في التمويل. وسرعان ما جمعت الشركتان شراكات مع شركات صيدلانية كبيرة مثل Merck & Co. وPfizer وRoche، وجميعها حريصة على اختبار التكنولوجيا.

وفي الوقت نفسه، بدأت شركات الأدوية الكبرى الأخرى، بما في ذلك نوفارتس وأستروزينكا، الاستثمار في انحلال البروتين المستهدف. برادنر، الذي انضم إلى نوفارتس في عام 2016 لرئاسة فرع البحث في الشركة، يقود شخصيًا وحدة إنحلال البروتين. ويقول إن نحو 200 من الكيميائيين وعلماء الأحياء وعلماء الكمبيوتر يساهمون.

إعادة تشكيل القواعد                                   

مع كثرة الشركات في هذا المجال، ستحتاج إلى إعادة التفكير في تصميم الأدوية ذات الجزيئات الصغيرة.حيث يتطلب بناء جهاز إنحلال البروتين النظر بعناية في كل مكون من مكوناته: رابط للبروتين ورابط الليجاز E3 والرابطة الكيميائية التي تربط الاثنين.

تتحدى الجزيئات بعضًا من أقدس مبادئ الكيمياء الطبية. والأكثر وضوحًا، أنهم كسروا قاعدة الكيميائي الطبي كريستوفر أ.ليبنسكي (قاعدة الخمسة) وهي مجموعة من المعايير للتنبؤ بما إذا كان الجزيء سيتصرف مثل دواء فموي جيد ومتوفر. وفقًا لهذه المعايير، فإن الوزن الجزيئي لمثبطات البروتين كبير وتتميز بوجود الكثير من نوعي الروابط الهيدروجينية(المستقبلة للالكترونات والمعطاءة).

 إن أجهزة إنحلال البروتين تختلف عن المفاهيم التقليدية للارتباط بالعقاقير والانتقائية والجرعات بالإضافة إلى عدم ظهور الأدوية العظيمة. تاريخيا، حاول الكيميائيون الطبيون صياغة جزيء يلتصق بهدفه – وفقط هدفه – مثل الغراء. وهم يعتقدون من حيث “الإشغال” – كم من الوقت يرتبط الدواء بالبروتين.

يقول فيليبس: “إذا سألت طبيبًا صيدلانيًا، فهل يفضلون أن يكون لديهم مُثبط بنسبة 95٪ لهدف أو 99٪ أو 99.9٪”، في معظم الأحيان سيقولون، “سوف آخذ مثبط 99.9٪ ، من فضلك.”

لكن لا تقاس قدرة مُحلل البروتين بمدى ارتباطه بالبروتين، إنما بالسرعة التي يمكن أن يجمع بها الجزيء ثنائي الوظيفة جميع اللاعبين المناسبين لتحفيز البروتين على وضع علامة عليه والتخلص منه.

هذا التحول من الديناميكا الحرارية الملزمة إلى حركية التفاعل هو ما يجعل الجميع متحمس لقدرة مُحللي البروتين على معالجة أهداف الأدوية التي كانت بعيدة المنال في السابق.

لا تحتاج نهاية الجزيء الذي يبحث عن البروتين إلى أن ينثني بداخله حتى يتم إيقافه ؛ تحتاج فقط إلى الاختلاط مع هدفها لفترة كافية لإنجاز المهمة. وعلى الرغم من أن 75٪ من البروتينات تفتقر إلى مكان الارتباط الذي يحتاجه مُثبط الجزيئات الصغيرة التقليدي، كما يقول Yale’s Crews “إذا نظرت إلى سطحها، فإنها تحتوي على زوايا وشقوق يمكن أن يزيلها المُحلل.”

تتزايد الأدلة أيضًا على أن النصف المرتبط بالبروتين من الجزيء لا يحتاج إلى الانتقائية المطلوبة عادةً لعقاقير الجزيئات الصغيرة.

عادة ما يرغب مطورو الأدوية في أن تلتصق الجزيئات بالهدف المقصود فقط؛ يمكن أن يسبب دواء يرتبط ببروتينات أخرى آثارًا جانبية سامة. لكن أظهر العلماء الأكاديميين مرارًا وتكرارًا أن مثبطات الاختلاط يمكن أن تتحول إلى مُحللات انتقائية. لم يتم شرح هذه الانتقائية بشكل كامل حتى الآن، لكن يشير الباحثون إلى أنه من أجل وضع علامة على البروتين مع يبوكيوتين، تحتاج  تلك الجزيئات إلى الالتواء في الشكل الصحيح في الوقت المناسب عبر عدة خطوات.

يقول برادنر من شركة نوفارتيس، “لتثبيط الجزيئات، الأمر كله يتعلق بالربط، ولكن هناك الكثير من الخطوات الميكانيكية المعنية – إنها دورة هدم تقوم بتقديمها.”

يوافق فيليبس على أن انتقائية المُحللين منطقية تمامًا. “أنا لست متفاجئًا بذلك، ببساطة بسبب ما أنشأته الطبيعة الأم كآلية خلفية.” ويلاحظ أن البروتينات تتدهور باستمرار باستخدام “علاقة منسقة بعناية، ثلاثية الأبعاد بين البروتين المستهدف و يبوكيوتين”

إلى المجهول

وليس لمجرد أن الباحثين لا يحتاجون إلى الالتزام بقواعد الكيمياء الطبية القديمة عند تصميم عقاقيرهم، فهذا يعني أن البروتينات البشرية فجأة أصبحت جاهزة للاستيلاء عليها.

يقول دانييل نومورا، خبير علم البروتينات الكيميائية بجامعة كاليفورنيا في بيركلي: “بحكم التعريف، إذا كان هدف البروتين”غير قابل للانحلال”، فربما لا يكون لديك جزيء صغير لاستهدافه”. ويشير إلى أن الجزيئات ثنائية الوظائف التي تم نشرها تحتوي على روابط متقاربة عالية الارتباط بالبروتين تم ذكرها بالفعل في المؤلفات العلمية.

بحكم التعريف، إذا كان هدف البروتين “غير قابل للانحلال”، فربما لا يكون لديك جزيء صغير لاستهدافه.

—دانييل نومورا، خبير في علم الكيمياء الكيميائية، جامعة كاليفورنيا، بيركلي

في الواقع، عندما تطلق أريفانز جزيئيها الأولين المحللين للبروتين إلى دراسات بشرية في وقت لاحق من هذا العام، فسوف يكسران بروتينات مميزة كمستقبل الأندروجين ويعتبر هدف لسرطان البروستاتا ومستقبل الأستروجين الهدف لسرطان الثدي. حتى الآن، لم تكشف أي مختبرات علنًا ​​عن جزيئات قوية ضد مُستهدفات غير قابلة للانحلال، على الرغم من أن الشركات والمختبرات الأكاديمية على حد سواء تدعي أن لديها بيانات غير منشورة تثبت أنها ممكنة.

يتخذ الباحثون مجموعة من الأساليب لتحديد الروابط الرابطة للبروتينات للمُستهدفات الصعبة. قام نومورا، الذي يُعد مختبره جزءًا من تعاون بين نوفارتس وجامعة كاليفورنيا في بيركلي يركز على أهداف غير قابلة للتدمير، بتطوير طريقة لاستخدام الجزيئات الصغيرة التساهمية لاستكشاف المُستقبلات المخفية على سطح البروتين.

ويقول: “الكثير من المواقع التي ينتهي بنا الأمر بتحديدها ليست مُستقبلات واضحة إذا نظرت إلى البنية البلورية الثابتة”

تشير الشركات إلى تقنية المكتبات المشفرة بالحمض النووي كنقاط انطلاق مثالية للعثور على متحللات البروتين. على عكس التصوير عالي الإنتاجية، والذي يلتقط المركبات التي تعدل نشاط البروتين، يتم استخدام المكتبات المشفرة بالحمض النووي للتحريك بحثًا عن الجزيئات التي ترتبط فقط بالبروتين. تسمح هذه التكنولوجيا للشركات بمسح الملايين – حتى المليارات – من المركبات التي تحمل شفرات شريط الحمض النووي التي يمكن تسلسلها للكشف عن بنية أي نتائج.

يشير إيان تايلور، رئيس علم الأحياء في Arvinas، إلى أنه بالإضافة إلى الكشف عن روابط البروتين، فإن شفرة الحمض النووي هو نقطة انطلاق طبيعية لبناء رابط البروتين المُحلل – السلسلة الكيميائية التي تربط البروتين وروابط أنزيم الليجاز. تستغرق Arvinas حوالي تسعة أشهر في تعاون مع Macroceutics لاستخدام المكتبات المشفرة بالحمض النووي لاستكشاف البروتينات التي كان يتعذر الوصول إليها سابقًا. ويضيف تايلور: “سنستثمر أكثر في هذا العام”.

هناك طريق آخر لربط البروتينات هو إحياء المركبات المعروفة بقدرتها على الارتباط على أهدافها (المستقبلات) ولكن لأسباب أخرى لم تكن قابلة للحياة. يمكن أن تشمل الأدوية التقليدية التي ربما لم تكن قوية بما فيه الكفاية أو كانت لها آثار غير مرغوبة. نظريًا، يمكن إعادة تصور هذه الجزيئات كجزء من البروتين المُتحلل.

وبصرف النظر عن العثور على روابط البروتينات التي لم تكن قابلة للاقتراب من قبل، فإنه لدى الباحثين بعض الإجراءات التي يقومون بها على الطرف الآخر من جزيئاتهم ثنائية الوظيفة، إنزيم إي3 الرابط. على الرغم من أن آلية يبوكيوتين_بروتاسيوم البشري تحتوي على أكثر من 600 من روابط E3، إلا أن العلماء توصلوا حتى الآن إلى روابط تحتوي على عدد قليل منها فقط.

تقول الشركات أنها ستكون قادرة على إحلال العديد من البروتينات حتى مع مجموعة الأدوات المحدودة. لكن يريد الباحثون العثور على إنزيمات إي3 الرابطة الأخرى والتي يمكن أن توسع قدراتهم. على سبيل المثال، يمكن أن يسمح تحديد الليجانات لإنزيمات إي3 الرابطة التي تعمل فقط في أنسجة معينة المطورين بتصميم عقاقير أفضل.

يقول فيليبس من C4: “اكتشاف المفاتيح الرئيسية – أو أي مفاتيح، بصراحة – بالنسبة لمجموعة إنزيمات إي    3الأساسية هو هدف متوسط المدى مهم لهذا المجال”. “نحن لا نحتاج بالضرورة لإنزيمات إي3 الرابطة الجديدة لتلبية الاحتياجات الطبية غير الملباة، ولكن إذا كان هذا المجال سيستفيد حقًا من هذه الموجة القوية، فسوف نحتاجها”.

لمواكبة هذا المجال

للوصول إلى المزيد من البروتينات البشرية، سيحتاج الباحثون إلى تصنيع عملية اكتشاف الأدوية. في هذه الأيام الأولى من أبحاث البروتين المُنحلل، الجزيئات هي في المقام الأول منتجات تجريبية. يقول سيولي من جامعة دندي إن المكونات عادة ما يتم تجميعها “بطريقة غير حادة”. “هناك حاجة واضحة لإدخال المجال في العصر الحديث لتصميم الأدوية القائمة على الهيكل.”

يجب أن يساعد تدفق رأس المال الاستثماري والفائدة من شركات الأدوية الكبرى. يقول لوران أوديولي، الرئيس التنفيذي لشركة Kymera: “نبذل قصارى جهدنا للتخلص من معظم التجريبية المرتبطة بهذه التكنولوجيا”. ويشير إلى أن الشركة قامت ببناء منصة لاكتشاف أدوية تهدف إلى تصميم أفضل الجزيئات، بدلاً من “العودة إلى عقار قديم وعدم القدرة فعليًا على شرح كيفية وصولك إلى هناك”.

الانتقال إلى تصميم الأدوية العقلاني مهم ليس فقط في تسريع العملية ولكن أيضًا في فهم الأهداف التي يجب متابعتها. والحقيقة هي أن الكيميائيين لا يمكنهم التنبؤ بالبروتينات التي يمكن أن تتدهور وما إذا كانت جزيئاتها – غير عملية حاليًا إلى حد ما – يمكنها الوصول إلى أماكن يصعب الوصول إليها مثل الدماغ أو يتم تحويلها باستمرار إلى حبوب فموية.

يقول مينولفي من Kymera: “غالبًا ما يخلط الناس بين حقيقة أنك لا تحتاج إلى مادة رابطة وظيفية على أنها تعني أنه يمكنك بشكل أساسي مُعالجة أي نوع من البروتين”. يضيف قائلًا: “أمضت Kymera الكثير من الوقت في محاولة تحديد العوامل التي تحول رابط البروتين المختلط إلى أداة انتقائية للبروتينات”

يحتاج الباحثون بالإضافة إلى فهمهم ما إذا كان البروتين يمكن أن ينحل، إلى معرفة ما إذا كان البروتين يجب أن ينحل أم لا. يحذر تشرشر BenevolentAI من أن هذه الجزيئات ثنائية الوظائف “يمكن أن تعطي تأثيرات عميقة في الجسم الحي”. “يمكن أن يكون هذا أمرًا جيدًا إذا أعطاك علم الصيدلة تأكيد بفعالية الدواء وشيئًا سيئًا إذا كان علم الأدوية يُأكد لك سُمّيته.” تستخدم BenevolentAI أدوات تحليل الذكاء الاصطناعي لمعرفة أفضل فرصة لعلاج المرض دون آثار جانبية خطيرة.

حتى عندما يشير الباحثون إلى كل العمل الذي لا يزال يتعين عليهم القيام به، فإنهم متحمسون أيضًا لتحول تحلل البروتين إلى مرحلته التالية: الدراسات البشرية. يقول فيليبس من C4 إن معرفة ما إذا كانت هذه الجزيئات يمكن أن تتسبب في انحلال البروتينات بشكل آمن ومحفز في البشر سيكون “المؤشر الأول، نعم ، ربما يمكن تحويلها إلى أدوية”.

تأمل Arvinas في أن يكون بروتاك المستهدف لمستقبلات الأندروجين جاهزًا للتجارب السريرية بحلول أكتوبر. قد يكون المرشح الدوائي الثاني، الذي يستهدف مستقبلات هرمون الاستروجين، جاهزًا للتجارب السريرية بحلول نهاية العام. شركات التكنولوجيا الحيوية وشركات الأدوية الكبرى الأخرى ليست بعيدة عن الركب، حيث من المتوقع اختبار العديد من الجزيئات في المرضى في العامين المقبلين.

بينما ينتظر الباحثون فكرة على كيفية عمل الأدوية في البشر، فإن التفاؤل مرتفع. يقول برادنر: “منذ أن انضممت إلى نوفارتيس، قام علماءنا بإحلال أكثر من 30 بروتينًا”. “إنها تثبت سهولة الاستخدام.”

لا تزال بعض البروتينات بعيدة المنال، لكن برادنر غير معني. يقول: “مع قليل من الحظ والكثير من الكيمياء، يمكننا أن نحط من أي شيء تقريبًا”

ترجمة: حنان الفقي

@FekiHanan

المصدر: https://cen.acs.org

مراجعة: تهاني محمد

تويتر : @Tixia0